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Résumé de la communication
Le neutrophile possède une très courte demi-vie dans le sang (8-12hrs). Celui-ci se dirige spontanément en apoptose. En général, plusieurs agents semblent moduler l'apoptose des neutrophiles via la synthèse protéique. Cependant, cette conclusion émane d'expériences dans lesquelles la cycloheximide (CHX) est ajoutée dans les cultures in vitro de neutrophiles. Très peu d'études ont démontré clairement la participation d'une protéine en particulier. Le présent projet a pour principal objectif de visualiser les protéines pouvant être impliquées dans l'apoptose spontanée, retardée par la cytokine GM-CSF, ou induite par la VAA-I, une lectine de plante. Pour ce faire, des neutrophiles seront fraîchement isolés et traités ou non avec les agents mentionnés et des lysats cellulaires seront préparés à différentes périodes de temps (0, 4, 12 et 24h). Les patrons électrophorétiques (1D et 2D-SDS-PAGE) seront effectués avec la portion intra- et extracellulaire et les protéines seront visualisées au bleu de Coomassie et/ou par coloration au nitrate d'argent. Des expériences seront également effectuées en incubant les neutrophiles en présence d'une solution de marquage in vitro ([35S]-méthionine et [35S]-cystéine). Les résultats nous permettront, à la fois, de mieux comprendre le mode d'action des agents utilisés et, éventuellement, d'élucider le rôle direct ou indirect que peuvent jouer certaines protéines dans le processus d'apoptose. Récemment, il a été observé que l'expression de certaines protéines semble être modulée à la hausse lors de l'apoptose retardée des neutrophiles.
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