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Résumé du colloque
Dans notre laboratoire, nous avons cloné 27 gènes ß-lactamases dans le but de les utiliser comme modèle d'étude pour: 1) l'évolution de la résistance aux ß-lactamines et 2) explorer le polymorphisme des gènes bla. Dans cette optique, les gènes bla CARB-3 et OXA-5 ont été clonés dans le vecteur plasmidique pACY184 et cartographiés à l'aide de d'endonucléases de restriction. La construction de plasmides de délétion a permis de localiser les gènes structuraux et la détermination des points isoélectriques a confirmé des enzymes protéiques. Une étude des acides nucléiques par hybridation à l'aide de sondes d'ADN intragénique ont permis des homologies entre CARB-3, PSE-4 et PSE-1 et entre OXA-5 et PSE-2. La détermination de la séquence par la méthode didésoxy et son analyse au niveau transcription/traduction suggère des régions -35 et -10 et des promoteurs avec des ribosomes atypiques. L'analyse des séquences par ordinateur laisse entrevoir des régions conservées chez les gènes bla de la ligature de site actif STFK et la triade KTG. Des études de phylogénie suggèrent que le gène OXA-5 diverge des classes connues.
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