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Résumé du colloque
Les capillaires cérébraux possèdent une structure unique constituant la barrière hématoencéphalique. La perméabilité sélective de ces capillaires envers des substances telles que les acides aminés et le glucose permet la régulation de la composition du milieu interstitiel cérébral. La phosphorylation des protéines étant un mécanisme de régulation intracellulaire très répandu, nous avons voulu démontrer l'existence de systèmes de phosphorylation au niveau des capillaires de cortex cérébral. Les études de phosphorylation ont été réalisées à partir de fractions purifiées de capillaires de cerveau et au rat ayant un enrichissement moyen de 14 en γ-glutamyl transpeptidase. Les autoradiographies obtenues par séparations de protéines sur électrophorèse révèlent plusieurs protéines phosphorylées. L'addition de 2mM EGTA dans le milieu réactionnel ou de calcium à forte concentration inhibe la phosphorylation des protéines (150K et 40K). L'ajout d'un inhibiteur compétitif des kinases (HT7) en présence de 2mM EGTA montre une inhibition respective de 45% et 85% pour les protéines de 150K et 40K. La phosphorylation du substrat de 150K demeure inchangée entre les pH 7,5 à 9,5, tandis que le substrat de 40K est préférentiellement phosphorylé à pH 9,5. Ces résultats suggèrent la présence de différentes kinases qui induiraient une activité kinasique inhibée par le calcium intracellulaire.
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