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Préparation des formes apoenzyme et holoenzyme de la 17B-Hydroxystéroïde déshydrogénase humaine

Jiu-Zhen Jin
Arezki Azzi
Sheng-Xiang Lin
Jing-Yu Wang
JJ

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Jiu-Zhen Jin

Résumé du colloque

La 17B-hydroxystéroïde déshydrogénase (17B-HSD) est responsable de la conversion des stéroïdes surrénaliens en androgène et estrogène qui stimulent le cancer de la prostate et le cancer du sein. Les formes apoenzyme et holoenzyme (complexe avec le NADP+) de la 17B-HSD de placenta humain sont préparées à l'aide d'une chromatographie d'affinité en utilisant différentes conditions d'élution avec la technique de FPLC. L'apoenzyme est obtenue en éluent avec le NAD+ et une colonne de "bleu-Sepharose". Le NAD+ est ensuite séparé sur une colonne à interaction hydrophobique ("phenyl-Sepharose") ou sur une colonne à échangeuse d'anions ("Mono Q"). L'holoenzyme est préparée en éluent avec le NADP+ la colonne de "bleu Sepharose". Ces deux formes de 17B-HSD ont des rapports A280/A260 différents et sont utiles pour l'étude des interactions enzyme-cofacteur. Cette méthode pourrait éventuellement être utilisée pour l'obtention des apoenzymes pour d'autres déshydrogénases.

Contexte

Section :
Biochimie, biologie moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biochimie, biologie moléculaire
host icon Hôte : Université du Québec à Rimouski

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Titre du colloque :

Biochimie, biologie moléculaire
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