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Préparation et caractérisation de dérivés de TCRs humains

Sandra Thibault
André Darveau
ST

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Sandra Thibault

Résumé de la communication

Les lymphocytes T (LyT) sont des cellules du système immunitaire qui reconnaissent des peptides présentés pas les molécules du Complexe Majeur d'Histocompatibilité de classe I et II de façon spécifique. Cette reconnaissance fait que les LyT sont des cellules importantes ayant un rôle primordial dans la réponse immune. La production et/ou la caractérisation de dérivés semblables aux TCRs a pour but de produire d'éventuels outils de diagnostic et de faire avancer l'immunothérapie. Ce récepteur des cellules T est composé de 2 chaînes (alpha/bêta ou gamma/delta), chacune étant formée d'une portion variable, responsable de la reconnaissance spécifique des antigènes, et d'une portion constante. Nous avons donc isolé l'ARN de LyT sélectionnés et amplifié l'ADN codant pour les régions variables des chaînes alpha et bêta. Ces 2 segments ont ensuite été unis par un peptide de 25 acides aminés. Un système d'expression chez la levure nous a permis d'exprimer le TCR à chaîne unique (scTCR) à la surface de la cellule. Une mutagénèse aléatoire a permis d'augmenter le niveau d'expression de ces scTCRs de façon significative. La sélection des levures exprimant les TCRs recombinants à leur surface a été effectuée par un tri en cytométrie en flux (FACS) et la présence du scTCR a été vérifiée par amplification par PCR et immuno buvardage. Les scTCRs ainsi obtenus peuvent par la suite être sélectionnés et caractérisés.

Contexte

Section :
Microbiologie, virologie et immunologie
news icon Domaine de la communication :
Microbiologie, virologie et immunologie
host icon Hôte : Université du Québec à Rimouski

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Thème du communication :

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