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Préparation et caractérisation des cellules myométriales de lapin et de bovin en culture

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André Boulet

Résumé du colloque

Au niveau de l'utérus, les récepteurs bêta-adrénergiques sont impliqués dans les mécanismes de la relaxation qui sont médiés par l'AMP cyclique. L'activité de ces récepteurs peut être évaluée par l'adénylate cyclase qui constitue, in vitro, une bonne approximation de la réponse contractile in situ. Chez le lapin, les cellules myométriales sont préparées par digestion enzymatique d'utérus dont l'endomètre a été enlevé. Ces cellules sont cultivées dans du RPMI 1640, supplémenté de 10% SVF, à une concentration de 0.5x10^6 cellules/ml; elles atteignent la confluence au 3ième jour. La préparation des cellules myométriales bovines est similaire à celle chez le lapin. Cependant, elles atteignent la confluence en 10 jours. Nous avons mesuré l'activité de l'adénylate cyclase sur du tissu frais et sur des cellules en culture. Les analyses préliminaires démontrent une activité basale comparable dans le tissu frais et dans les cellules en culture. Dans les deux cas, l'activité est stimulée par l'isoprotérénol. Chez le bovin, l'activité du tissu frais est supérieure à celle relevée dans les cellules en culture. Cependant, à 5 minutes en ATP présente une concentration 4 fois inférieure à celle requise chez le lapin. L'activité de l'adénylate cyclase des cellules en culture peut être stimulée par une dose croissante d'isoprotérénol. Cette stimulation requiert la présence de GTP et est inhibée par le 10^-5M (EC.50 = 0.7µM). Nous avons étudié également l'effet d'un traitement des cellules à l'estradiol et à la progestérone sur l'activation de l'adénylate cyclase.

Contexte

Section :
Endocrinologie
news icon Thème du colloque :
Endocrinologie
host icon Hôte : Université du Québec à Chicoutimi

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Titre du colloque :

Endocrinologie

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