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Présentation de molécules du CMH murin recombinantes par des cellules d'insecte comme modèle d'étude de l'activation des lymphocytes T et la délétion des thymocytes murins

Marylene Fortin
Martin Pagé
Sylvie Lesage
Josee Charron
Patrice Hugo
MF

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Marylene Fortin

Résumé du colloque

Les lymphocytes T autoréactifs sont éliminés dans le thymus par induction d'apoptose (sélection négative). Il a été montré in vitro que des interactions de fortes affinités entre des lymphocytes immatures (thymocytes) exprimant un récepteur T (TCR) transgénique et des molécules du complexe majeur d'histocompatibilité (CMH), associées à un peptide antigénique et immobilisées sur une matrice, ne suffisent pas à induire l'apoptose. Par contre, l'apoptose peut être déclenchée par l'ajout d'un anticorps contre une molécule de co-stimulation (CD28) exprimée par les thymocytes. L'objectif de cette étude est donc de vérifier si les complexes peptide/CMH, incorporés dans une membrane cellulaire, peuvent induire l'apoptose, en absence de co-stimulation. Pour ce faire, les gènes codant pour ces complexes ont été transfectés dans des cellules d'insecte (Hi-5), qui ne devraient pas exprimer de ligands de récepteurs murins exprimés par les thymocytes. Afin de vérifier que ces molécules recombinantes sont fonctionnelles, leur gène a d'abord été transfecté dans des cellules CH12 (lymphome B). Les résultats obtenus démontrent que les complexes peptide/CMH recombinants exprimés à la surface cellulaire peuvent 1) induire l'activation d'hybridomes T spécifiques et 2) induire l'apoptose des thymocytes exprimant le même TRC transgénique. L'antigénicité des complexes transfectés dans les cellules Hi-5 sera confirmée de la même manière par l'activation d'hybridomes T spécifiques. De plus, l'absence de co-stimulation sera évaluée en utilisant des lymphocytes T matures périphériques, qui eux requièrent l'engagement de molécules co-stimulatrices, comme le CD28, pour être activés. Enfin, ces cellules d'insecte transfectées seront utilisées pour déterminer si la seule liaison des complexes peptide/CMH par le TCR suffit à induire l'apoptose des thymocytes, en absence de co-stimulation.

Contexte

Section :
Biologie cellulaire et moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biologie cellulaire et moléculaire
host icon Hôte : Université de Trois-Rivières

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Titre du colloque :

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