Colloque

Production et purification d'anticorps monoclonaux spécifiques des cellules NK des lignées C57BL/6

Yvette Lusignan

Lidia Morelli

Suzanne Lemieux

Membre a labase

Yvette Lusignan

Résumé du colloque

Les marqueurs spécifiques non-alléliques NK-1.1 et NK-2.1 sont tous deux présents sur les cellules NK de la lignée C57BL/6, mais non sur celles de la lignée B10. Des deux lignées exprimant de plus les mêmes allèles pour tous les autres allèles présents à la surface de ces cellules, cette combinaison génétique a été utilisée pour produire des anticorps monoclonaux spécifiques des cellules NK. Le protocole retenu consistait à immuniser des souris de lignée B10 avec un surnageant riche en cellules NK spléniques provenant de souris C57BL/6. Les hybrides sécrétant des IgG monoclonaux ont ensuite été fusionnés avec des cellules de myélome BALB/c, ce qui a permis la sélection de plusieurs lignées de la lignée 4LO-439 qui produisent des anticorps détectant un nouveau marqueur, présent uniquement chez les lignées consanguines et congéniques sur fond B6. Ces anticorps monoclonaux, d'isotype IgG3, ont été purifiés par chromatographie d'affinité sur colonne de protéine A. La pureté des anticorps monoclonaux isolés a été confirmée par électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de SDS. Les anticorps monoclonaux anti-NK purifiés ont conservé leur capacité d'inhiber, en présence de complément, l'activité NK de cellules spléniques provenant de souris C57BL/6, confirmant ainsi que la procédure de purification n'a pas altéré l'activité biologique des anticorps sécrétés par le clone 4LO-439.

Contexte

Section :

Microbiologie, virologie et immunologie

Thème du colloque :

Microbiologie, virologie et immunologie

Hôte : Université du Québec à Montréal

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Titre du colloque :

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