Colloque

Purification de l'ARN messager de l'alpha-foetoprotéine de rat et synthèse d'un ADN complémentaire

P. Baril

J. Bartkowiak

L. Bélanger

Membre a labase

P. Baril

Résumé du colloque

Nous avons isolé l'ARN messager codant pour l'alpha-foetoprotéine (AFP) par une combinaison de méthodes immunologiques et physico-chimiques, à partir de vésicules embryonnaires de rates gestantes. L'ARN messager est pur et fonctionnellement intact selon des critères de sédimentation, d'électrophorèse et traduction in vitro. Le mRNAFP mesure environ 2000 bases (P.M. de l'ordre de 0.8 x 10^6) et compte de longues séquences non codantes. Le mRNAFP a servi à la synthèse d'un ADN complémentaire (cDNA) radioactif, utilisant une ADN polymérase d'origine virale (reverse transcriptase). Nous avons défini les conditions optimales pour la production de cDNA, selon les concentrations de messager, d'enzymes de précurseurs et de cofacteurs. Le cDNAFP a été caractérisé par sédimentation sur gradient alcalin de sucrose, par électrophorèse en gel d'agarose et par hybridation moléculaire en dénaturation thermique. La longueur des séquences produites varie de 1000 à 2400 bases.

Contexte

Section :

Biochimie et biologie cellulaire

Thème du colloque :

Biochimie et biologie cellulaire

Hôte : Université de Sherbrooke

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Titre du colloque :

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