Colloque

Purification de l'hémagglutinine du virus de la rubéole par chromatographie d'affinité

R. Comtois

M. Trudel

P. Payment

Membre a labase

R. Comtois

Résumé du colloque

Le surnageant de cultures cellulaires Vero infectées par le virus de la rubéole, récolté puis concentré environ 200 fois par ultrafiltration, est traité au Tween 80 et à l'éther pour dissocier l'hémagglutinine de l'enveloppe. Nous introduisons ensuite l'antigène dans une colonne de Sepharose 6B couplé à des anticorps spécifiques de la rubéole, obtenus d'après la méthode décrite dans la littérature, égale à 1:512 par le test d'inhibition de l'hémagglutination. L'antigène se fixe aux anticorps en 2 heures à 20°C. Après la fixation nous éliminons par lavage tout ce qui n'est pas fixé. Les traitements avec NaCl 1 à 5M, thiocyanate de sodium 1 à 5M et MgCl2 1 à 5M ont été testés pour l'élution. Les fractions contenant l'antigène sont immédiatement désalinisées sur colonne de Sephadex G-25 et l'hémagglutinine titre par le test d'hémagglutination et par dosage des protéines. Les premiers résultats indiquent un taux de recouvrement de l'antigène d'environ 50% avec MgCl2.

Contexte

Section :

Microbiologie et immunologie

Thème du colloque :

Microbiologie et immunologie

Hôte : Université Laval

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