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Purification de l'inhibine de liquide folliculaire ovarien de porc

M. Godbout
F. Labrie
MG

Membre a labase

M. Godbout

Résumé du colloque

Suite à un traitement au charbon-dextran activé nous permettant d'éliminer plus de 99% des stéroïdes endogènes contenus dans le liquide folliculaire de porc, nous avons d'abord effectué des précipitations fractionnées au sulfate d'ammonium. La fraction précipitant entre 20 et 40% de saturation a été ultrafiltrée et le liquide retenu par la membrane (YM-10) a été déposé sur une colonne de Concanavaline-A-Sepharose (C16/70). La fraction post-éluée par mannoside absorbé le gel ne contient pas d'activité inhibitrice sur les niveaux de base de sécrétion de FSH contrairement à la fraction glycoprotéique éluée en présence de 50 mm -méthyl-D-glucopyranoside et 0.5M NaCl dans 50 mM Tris-HCl, pH 8.0. Cette fraction purifiée, une fois dialysée, a été déposée sur une colonne échangeuse d'ions, DEAE-Sepharose-CL-6B et a été éluée avec un gradient de 0.05M à 0.5M NaCl. Sept fractions sont alors obtenues, la cinquième ayant une activité "inhibine" inhibant la sécrétion de FSH à 100 ng/ml. Cette fraction a été caractérisée sur gel de polyacrylamide en présence ou absence de SDS ainsi que par isoelectrofocusing. Ces derniers résultats nous indiquent que l'inhibine est une molécule à caractère glycoprotéinique présentant une hétérogénéité probablement reliée en grande partie à sa composante glucidique.

Contexte

Section :
Endocrinologie
news icon Thème du colloque :
Endocrinologie
host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

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