Colloque

Purification des capillaires cérébraux bovins et étude de leurs propriétés enzymatiques

Lise Dallaire

Richard Beliveau

Membre a labase

Lise Dallaire

Résumé du colloque

Les cellules endothéliales des capillaires cérébraux forment une barrière spécialisée dans le contrôle des échanges entre le sang et le cerveau. Ces cellules de la barrière hémocéphalique se caractérisent par l'absence de fenestration, de pinocytose et de canaux transendothéliaux ainsi que par la présence de jonctions serrées joignant ces endothéliums. Notre but est d'isoler ces capillaires avec un degré de purification et un rendement élevés. Nous avons mis au point une méthode rapide de purification des capillaires cérébraux de bovins. L'homogénéisation du cortex cérébral est suivie d'une centrifugation en présence de Dextran 15% et d'une purification des capillaires sur colonne de billes de verre. Leur degré et leur viabilité ont été vérifiées par microscopie photonique à contraste de phase. Les capillaires purifiés sont constitués de petites vésicules et de jonctions étanches vésules et artérioles. L'activité de marqueurs enzymatiques spécifiques aux capillaires (glutamyl transpeptidase (G.T.) et phosphatase alcaline (P.A.)) est mesurée. Nous obtenons un enrichissement de 33 et 43 en G.T. et P.A. respectivement. Nous avons mesuré l'activité totale 0.7% des protéines totales pour un rendement de 400 µg/g de cortex. Ces capillaires sont capables de concentrer 15 fois plus le glucose et 10 fois plus pour dévoiler des protéines majeures de bas poids moléculaires (15000). Nous proposons que ces modèles de fonctions de transport associés à la barrière sanguine, avec les capillaires intacts et leurs enzymes, peuvent être utilisés pour des applications variées.

Contexte

Section :

Biologie cellulaire

Thème du colloque :

Biologie cellulaire

Hôte : Université du Québec à Montréal

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