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Purification des grains de zymogènes de pancréas: composition et structure des protéines de leur membrane

M.R. Paquet
P. St-Jean
A. Lord
A.R. Beaudoin
MP

Membre a labase

M.R. Paquet

Résumé du colloque

Nous avons préparé une fraction très pure de grains de zymogènes. La pureté de la fraction a été déterminée par l'augmentation de l'activité spécifique de l'amylase et de la chymotrypsine (4 fois). La fraction purifiée est dépourvue de cytochrome oxydase, d'ADN et d'ARN mesurables, ce qui signifie que les contaminants habituels de cette fraction, les mitochondries, les noyaux et le réticulum endoplasmique rugueux sont absents. La pureté de la fraction est confirmée de façon définitive par la microscopie électronique. Des membranes ont été préparées en resuspendant les grains de zymogènes dans un tampon hypotonique. Les membranes ont été séparées de leur contenu en concentrant à l'interface (0.3 - 1.0 M) de deux solutions de saccharose. Les protéines structurales ont été ensuite solubilisées avec du Triton X-100 et séparées en double dimension: isoélectrofocalisation et SDS-électrophorèse en gel de polyacrylamide. Selon une approche inusitée, nous tentons maintenant de déterminer la distribution des protéines de la double feuille membranaire. Ces études sont réalisées en vue de déterminer les mécanismes de reconnaissance et de fusion des grains de zymogènes à la membrane luminale.

Contexte

Section :
Biochimie
news icon Thème du colloque :
Biochimie
host icon Hôte : Université de Montréal

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Titre du colloque :

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