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Purification du coronavirus intestinal du lapin (CVIL)

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Denis Lachance

Résumé du colloque

Des études démontrent que l'utilisation d'un gradient de saccharose est recommandée pour la purification des coronavirus. Afin d'entreprendre l'étude des protéines structurales du CVIL, le virus fut purifié sur gradient de saccharose. Des matières fécales prélevées chez de jeunes lapins infectés furent d'abord homogénéisées, clarifiées puis concentrées sur colonne de filtration. Douze mL du homogénat concentré furent déposés sur un gradient discontinu de saccharose (60,45,38,25%) et ultracentrifugés à 100 000 g pendant 16 h à 4°C. Des fractions de 1 mL furent recueillies et évaluées par immunoélectrophorèse. Les épreuves HI et IH furent aussi utilisées afin de caractériser les propriétés hémagglutinantes du virus. Les résultats démontrent que l'immunogénicité du CVIL fut conservée. Des capsides moyennes furent aussi observées et la présence de rosettes a été démontrée. Les résultats de l'épreuve HI indiquent la présence de titres plus forts notés dans des fractions autres que celles contenant les zones entières. Quant à la densité du CVIL, elle était de 1,189. Les résultats indiquent donc que le saccharose semble être un bon adjuvant pour la purification de particules de CVIL.

Contexte

host icon Hôte : Université de Montréal

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