Colloque

Purification du virus respiratoire syncytial humain par centrifugation en gradient de densité: comparaison du saccharose, Percoll et Nycodenz

Angélique Mbiguino

Michel Trudel

Pierre Payment

Membre a labase

Angélique Mbiguino

Résumé du colloque

La caractérisation et l'analyse des protéines structurales du virus respiratoire syncytial humain (VRSH) nécessite la purification du virus. L'ultracentrifugation en gradient de saccharose a donné, à ce jour, les meilleurs résultats. Mais la forte osmolalité et viscosité de ce milieu, combiné à la fragilité de ce virus enveloppé, entraîne l'inactivation de 65.7% de son infectivité après un cycle de centrifugation. La recherche d'une méthode supérieure de purification, nous a amené à évaluer, en ultracentrifugation, l'efficacité des milieux aromatiques iodés développés pour la radiographie, tel le métrizamide et le Nycodenz et le silice sous forme colloïdale (Percoll). Ces milieux ont l'avantage d'être isosmolaires et beaucoup moins visqueux que le saccharose. Les résultats obtenus avec la purification du VRSH démontrent que ces milieux sont nocifs pour le virus et que l'inactivation est supérieure à 99% après deux heures de contact bien que les particules virales semblent intactes lorsque visualisées en microscopie électronique. La purification du VRSH en gradient de saccharose demeure la méthode de choix pour la purification de ce virus.

Contexte

Section :

Microbiologie, virologie et immunologie

Thème du colloque :

Microbiologie, virologie et immunologie

Hôte : Université Laval

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Titre du colloque :

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