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Purification partielle d'un facteur induisant la morphogenèse cryptale dans l'intestin de souris foetale en culture organotypique

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Guy Bordeleau

Résumé du colloque

Récemment nous avons démontré que le liquide amniotique de rat (LAR) à 19 jours de gestation contient un facteur induisant la formation de cryptes (Anat. Rec. 205: 27-37, 1983). Lorsqu'un extrait organique de LAR est ajouté au milieu Trowell 78, des cryptes apparaissent dans les explants d'intestin de souris foetales de 15 jours cultivés durant 48 h à 37°C, dans les explants témoins les cryptes sont absents. Cette activité est appelée CDF (Crypt differentiation factor). L'activité CDF de l'extrait organique est bien préservée après un chauffage à 50°C ou 100°C pendant 10 min. Cependant elle est éliminée par adsorption sur le charbon activé, avant ou après chauffage de l'extrait à 100°C durant 10 min. L'activité CDF résiste à la trypsination, même après 120 min. d'incubation. Par HPLC en phase inversée, le CDF peut se fractionner et présente une polarité élevée. La chromatographie sur tamis moléculaire par HPLC, sur colonne Protein I 125, permet de purifier l'activité CDF environ 10 fois par rapport au LAR lyophilisé. Le poids moléculaire apparent du CDF est de 13,000 daltons. La co-culture de l'intestin foetale de souris de 15 jours avec des précurseurs de membrane amniotique indique que le rat femelle aussi la différenciation des cryptes intestinales; ces membranes pourraient être responsables de la production du CDF.

Contexte

host icon Hôte : Université du Québec à Chicoutimi

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