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Purification, précipitation de zone, électrofocusing et isotachophorèse de la diamine oxydase

JP

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J.-M. Pionetti

Résumé du colloque

La diamine oxydase extraite du rein de porc a été purifiée en utilisant les techniques suivantes: dénaturation thermique, précipitation au sulfate d'ammonium, ultrafiltration, ultracentrifugation, chromatographie sur Sephadex G-150 et sur DEAE-cellulose. Dans les méthodes antérieurement proposées la précipitation par les sels était utilisée de façon peu sélective; par l'adjonction de la zone de densité, la région de précipitation maximum (49-55% de saturation) ont été réduite jusqu'à une fraction de 1 point isoelectrique de la diamine oxydase (pI5.3) a été obtenu par electrofocusing sur gel de polyacrylamide et sur gradient de sucrose en présence de détergent anion ionique. La purification de cette enzyme a également été réalisée par isotachophorèse, les résultats montrent le pouvoir de résolution élevé de cette technique.

Contexte

host icon Hôte : Université Laval

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