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Quantification de la survie et de la prolifération de myoblastes transplantés par amplification compétitive spécifique au chromosome Y

Nicolas Caron
Daniel Skuk
Jacques P. Tremblay
Pierre-Alain Moisset
Annie Dicaire
NC

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Nicolas Caron

Résumé du colloque

La transplantation de myoblastes est une approche potentielle pour le transfert de gènes dans le muscle. Cependant son efficacité dépend du nombre de copies génomiques du donneur pouvant être incorporées à long terme dans le tissu de l'hôte. Les méthodes nécessitant l'incorporation de nucléotides radioactifs ou de composés fluorescents dans les cellules greffées ne permettent pas de mesurer l'influence de la prolifération cellulaire dans les jours suivants la greffe. Alors que la mesure de l'activité enzymatique amenée par des transgènes introduits dans les cellules est facilement perturbée par des variations transcriptionnelles indépendantes du nombre de cellules. Des myoblastes mâles furent transplanté dans des muscles femelles. Nous avons estimé le nombre de génomes mâles restants en rapport à différents paramètres expérimentaux par l'amplification compétitive spécifique d'une région du chromosome Y. Dans chaque extrait, la quantité de chromosome Y détecté fut utilisé pour estimer le nombre de cellules du donneur en fonction du temps. Nous avons développé une méthode qui ne dépend pas du niveau d'expression d'un transgène et qui ne nécessite pas la modification génétique des cellules ou l'incorporation radioactive avant la greffe. Cette méthode nous permet de mieux évaluer la chronologie de la prolifération et de la mort des cellules transplantées et ainsi de mieux cerner les problèmes qui limitent le succès de la transplantation de myoblastes pour la thérapie de la dystrophie musculaire de Duchenne.

Contexte

Section :
Biologie et génétique moléculaires
news icon Thème du colloque :
Biologie et génétique moléculaires
manager icon Responsables :
Louis Bernatchez
host icon Hôte : Université Laval

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Titre du colloque :

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