Colloque

Rassemblement de sous-unités 30S fonctionnelles à partir d'un RNA 16S obtenu par transcription in vitro sous contrôle d'un promoteur T7

Pierre Melançon

Guy Boileau

Léa Brakier-Cingras

Membre a labase

Pierre Melançon

Résumé du colloque

Le RNA 16S joue un rôle prépondérant dans le fonctionnement du ribosome bactérien. Nous avons construit un plasmide dérivé de pUC18 (pPM111) contenant, directement en aval d'un promoteur spécifique pour la polymérase T7, la séquence codante pour le RNA 16S. Cette séquence avait été clonée par transgenèse à partir de RNA 16S. Il est possible de transférer efficacement le RNA 16S à partir de pPM111 et ce transcrit, quoique incomplet, peut s'associer avec les protéines ribosomiques pour former des sous-unités 30S. Les sous-unités 30S ainsi reconstituées conservent avec des sous-unités 30S natives la même capacité de polymériser du poly(U) en présence de polyphénylalanine sous la direction du poly(U). Ce système permet d'introduire des mutations dans des sites choisis du RNA 16S et les conséquences fonctionnelles de ces mutations peuvent être étudiées in vitro avec la reconstitution de sous-unités 30S avec le RNA 16S ainsi modifié.

Contexte

Section :

Biologie moléculaire

Thème du colloque :

Biologie moléculaire

Hôte : Université d’Ottawa

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Titre du colloque :

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