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Recombinaison spécifique de site chez Chlamydia trachomatis: surproduction et purification du produit du gène

Jean-Pierre Buisson
Paul H. Roy
JB

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Jean-Pierre Buisson

Résumé du colloque

Chlamydia trachomatis est reconnu comme un organisme pathogène fréquemment rencontré dans les maladies transmisses sexuellement et causant aussi des maladies oculaires chez l'homme. Cet organisme possède un plasmide omégaérites de 7.5 kilo paires de bases (kb). Un cadre de lecture (CLO), des huit trous ouverts de plasmide, pourrait correspondre à un gène codant pour une DNAse de E. coli qui joue un rôle dans la réplication. Dans notre laboratoire, nous avons démontré que ce gène, ainsi que d'autres, similaires aux ADN recombinases de la famille des intégrases, sont impliqués dans la recombinaison spécifique de site et l'intégration de ces plasmides dans le chromosome, ce qui confère aux organismes de résistance aux antibiotiques. Nous avons trouvé un gène potentiel, qui jusqu'ici n'est pas rapporté comme membre de la famille des intégrases, celui-ci étant retrouvé sur le plasmide de C. trachomatis. Afin de caractériser le gène comme étant un membre de la famille des intégrases de bactériophages, nous devons trouver le site d'attachement de la recombinaison sur le plasmide C. trachomatis et analyser la recombinaison au site par gel de retardement et l'coorporting. Les résultats qui suivent démontrent les étapes préliminaires effectuées avant le début de l'étude de l'interaction ADN-protéine au site d'attachement. Notamment, nous démontrons la résolution d'erreurs de séquences, ainsi que la surproduction clonée de ce produit de fusion, jusqu'à la purification quasi homogène de la protéine se lie. Une fois la protéine obtenue en quantité suffisante, celle-ci servira pour l'étude de l'interaction ADN-protéine et aussi, à l'étude de sa structure moléculaire par cristallographie et patron de diffraction aux rayons-X.

Contexte

Section :
Biochimie, biologie moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biochimie, biologie moléculaire
host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

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Titre du colloque :

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