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Régulation de l'expression du gène encodant le facteur d'inhibition de croissance neural (GIF/MT-111)

Jean-Charles Dussault
Raffaella Faraonio
Olivier Larochelle
Carl Séguin
JD

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Jean-Charles Dussault

Résumé du colloque

Le facteur d’inhibition de croissance neurale, GIF, aussi appelé métalothioneine-III (MT-III), inhibe la survie des neurones en culture, et son expression est réprimée chez les patients souffrant de la maladie d’Alzheimer. L’expression de MT-III se distingue des autres MT de deux façons : 1) MT-III se retrouve uniquement dans le cerveau, les autres MT étant exprimées dans la plupart des tissus. 2) MT-III n’est pas stimulable par les métaux lourds bien que son promoteur possède, comme les autres MT, des éléments de réponse aux métaux lourds (MRE). Dans le but d’identifier les éléments du promoteur de MT-III responsables de son inhibition dans les tissus non neuraux, nous avons procédé à des expériences de transfections dans des cellules en culture. Le promoteur du gène de MT-III de souris a été fusionné au gène de la CAT dans le vecteur pCATbasic pour générer pMT3-CAT. Cette construction a été transfectée dans les cellules CV-1. Le plasmide pMT3-CAT n’est pas exprimé ni stimulable par les métaux, démontrant ainsi que les séquences de régulation en cis du gène MT-III sont responsables de l’inhibition dans ces cellules. De plus, un promoteur hybride formé du promoteur minimal de la MT-III (-36 à 49) et de la région distale du promoteur de la MT-I (-590 à -35) était actif dans les cellules CV-1, alors qu’un hybride formé du promoteur minimal de MT-I (-35 à 64) et de la région distale du promoteur de la MT-III (-180 à -38) était inactif. Ces résultats montrent que le promoteur minimal de MT-III de souris, incluant le site d’initiation de la transcription, est fonctionnel, alors que la région distale ne l’est pas. L’insertion de MRE dans le promoteur de la MT-III n’augmente pas significativement la réponse aux métaux lourds. Des études d’empreintes à la DNase-I sont présentement en cours pour identifier les protéines nucléaires se liant au promoteur du gène MT-III.

Contexte

Section :
Biologie cellulaire et moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biologie cellulaire et moléculaire
host icon Hôte : Université McGill

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Titre du colloque :

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