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Résumé du colloque
La saccharose synthase (Susy; EC 2.4.1.13) catalyse la conversion réversible du saccharose en UDP-glucose et fructose. Dans ces travaux, nous étudions la possibilité d'une modification post-traductionnelle de l'enzyme dans le fruit de tomate. La détection immunologique de deux peptides stables de la Susy (Mr. de 90.000 et 100.000) ne provient pas d'une modification covalente par glycosylation d'un peptide unique. Des essais in vitro utilisant l'activité kinase endogène d'extraits de fruits de 25 JAA, ont mis en évidence l'incorporation de phosphore-32 dans les deux peptides au niveau de l'acide aminé sérine. Cette phosphorylation est dépendante du calcium et fortement activée en présence de magnésium. Le site tryptique majeur de phosphorylation in vitro a été purifié par chromatographie d'affinité IDA-Fe et HPLC (C18), puis séquencé. Le résidu sérine-11, identifié comme le site de phosphorylation majeur, n'est pas présent dans la séquence de l'ADNc Tomssf de tomate, malgré la forte conservation de ce site entre les différentes espèces végétales. La cartographie peptidique de la digestion tryptique de la Susy suggère la présence d'autres sites de phosphorylation mineur. L'implication de ces différents sites dans la régulation de la Susy de tomate sera discutée.
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