Colloque

Répression transcriptionnelle du promoteur du gène peptide natriurétique de type B

Suparna S. Bhalla

Mona Nemer

Membre a labase

Suparna S. Bhalla

Résumé du colloque

L'usage combiné de facteurs de transcription à effets positif et négatif résulte en une restriction spatio-temporelle de l'expression des gènes. Les répresseurs jouent un rôle important afin de prévenir l'expression ectopique des gènes. Nous étudions les mécanismes moléculaires responsables de l'expression spécifique aux cellules cardiaques du gène du peptide natriurétique de type B (BNP). Le gène BNP est un membre de la famille de gènes qui encodent des hormones exprimées spécifiquement dans le cœur. Lors d'essais de transfections transitoires, une séquence de 2.2 kpb du promoteur s'est avérée suffisante pour conférer l'expression spécifique du gène BNP aux cellules cardiaques. Dans les cellules cardiaques, les premières 120 pb contiennent les sites d'interaction avec le facteur de transcription GATA-4 et sont suffisantes pour reproduire l'activité maximale du promoteur. Cependant, des séquences distales du promoteur sont requises pour restreindre l'activité du promoteur BNP aux cellules cardiaques, puisque leur délétion mène à la dérépession du promoteur en cellules non-cardiaques. De plus, l'ajout de ces séquences en amont du promoteur de la kinase de la thymidine (KT) réduit de 4 à 6 fois son activité transcriptionnelle, suggérant la présence d'un répresseur dominant. Ce répresseur n'est pas actif dans les cellules cardiaques. Dans les cellules non-cardiaques, l'effet du répresseur est indépendant de son orientation et s'apparente à l'action des éléments "silencer". Des expériences de délétions en 5 ont permis d'identifier une séquence de 20 pb possédant les propriétés de répresseur. Cette séquence de 20 pb qui contient les sites putatifs pour la liaison des protéines de répression cut est suffisante pour une répression maximale dans un contexte natif ou hétérologue. Nous procéderons à des expériences de mutagenèse et de retard sur gel pour confirmer l'existence de sites d'une interaction entre le répresseur et les protéines cut. Si tel n'est pas le cas, nous caractériserons la nature du facteur liant ce nouvel élément répresseur. En conclusion, nos résultats indiquent que la répression est un mécanisme important dans le contrôle de l'expression histo-spécifique du gène BNP.

Contexte

Section :

Biologie cellulaire et moléculaire

Thème du colloque :

Biologie cellulaire et moléculaire

Hôte : Université McGill

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Titre du colloque :

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