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Résumé du colloque
Au cours de nos études sur le contrôle de la synthèse de RNA par les acides aminés, nous nous sommes intéressés aux RNAs nucléaires à faible poids moléculaire, afin de dissocier l'effet stimulateur global des acides aminés et leurs effets spécifiques possibles sur les différentes espèces de RNAs. Des homogénats de tumeurs hypophysaires (MtT/F4) ou de foie de rat sont portés à une concentration 1% en Triton X 100 et les noyaux sont déposés par centrifugation à 1,000g pendant 30 secondes. Le RNA nucléaire est extrait avec phénol-SDS à la température de la pièce et à 65°C à partir des noyaux entiers, du nucléoplasme ou des nucléoles. Après une première purification du RNA sur gradient de densité, les gels de polyacrylamide de profil de la densité optique est déterminé à 635 nm après coloration au bleu de méthylène. Le RNA à faible poids moléculaire (snRNA) extrait à 24°C des deux types de tissus présente un profil contant constitué de 6 bandes majeures et de 10 bandes mineures après électrophorèse sur gels de polyacrylamide 10%. 6 espèces de snRNA se retrouvent après ré-extraction à 65°C. 3 espèces sont d'origine nucléolaire et sont extraites de préférence à 65°C.
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