Colloque

Rôle de la phosphorylation des sous-unités des neurofilaments lors de leur réassemblage

Elias Georges

Walter E. Mushynski

Membre a labase

Elias Georges

Résumé du colloque

Les neurofilaments sont une sous-classe des filaments intermédiaires (10 nm) retrouvés dans les neurones. Chez les mammifères, les neurofilaments sont formés de trois sous-unités ayant chez le rat des poids moléculaires de 200, 145 et 68 kd. Ces filaments ne peuvent être solubilisés qu'en présence d'agents dénaturants tel l'urée et leur réassemblage en filaments devient possible en éliminant l'agent dénaturant par dialyse. Les sous-unités de 200 et 145 kd sont hautement phosphorylées et contiennent respectivement environ 23 et 9 moles de phospho/mol de polypeptide. Nous avons étudié le rôle de la phosphorylation des sous-unités lors de leur réassemblage. Des fractions enrichies en neurofilaments furent préparées par fraction axonale, à partir de troncs cérébraux et de moelles épinières de rats. Les neurofilaments furent alors déphosphorylés in vitro à l'aide de phosphatase alcaline d'intestin de veau. Les neurofilaments déphosphorylés furent par la suite mis en solution dans 8 M urée et réassemblés en filaments par dialyse contre 25 mM imidazole, pH 7.1, 105 mM KCl, 5 mM MgSO4, 5 mM EGTA, 1 mM PMSF et 0.125 mM DTT. A l'aide de contrôles appropriés, nous avons démontré que la phosphorylation des sous-unités des neurofilaments n'est pas essentielle à leur réassemblage. Cependant, la phosphorylation semble être impliquée dans d'autres aspects fonctionnels des neurofilaments.

Contexte

Section :

Biochimie

Thème du colloque :

Biochimie

Hôte : Université Laval

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