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Rôle de la protéine Gl dans l'activation de l'ostéoclaste : interactions protéiques et localisation cellulaire

Janie Beauregard
Jean Vacher
Monica Pata
JB

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Janie Beauregard

Résumé de la communication

La formation de la matrice osseuse est assurée par l'ostéoblaste, une cellule d'origine mésenchymateuse, alors que les ostéoclastes sont des cellules hématopoïétiques multinucléées qui résorbent la matrice osseuse. L'ostéopétrose autosomale récessive maligne est une maladie rare caractérisée par l'incapacité de l'ostéoclaste à résorber l’os. Il en résulte des os denses, fragiles, un sous-développement de la moelle osseuse et une anémie. La souris grey-lethal (gl) est le modèle animal idéal pour l'étude de l'ostéopétrose. Nous avons montré que les ostéoclastes gl/gl sont incapables de résorber l'os dû à un défaut de formation de la membrane plissée et que la mutation gl est une délétion qui abolit l'expression du gène. La protéine Gl est cytoplasmique, comprend un peptide signal et un domaine transmembranaire potentiels. Afin d'établir ses interactions, nous avons utilisé une approche double-hybride qui nous a permis d'identifier plusieurs protéines partenaires associées au compartiment vésiculaire et sécrétoire. Ces interactions seront confirmées dans des cellules de mammifères par co-immunoprécipitation et les domaines d'interaction entre partenaires seront caractérisés. Afin de caractériser la localisation de la protéine Gl in vitro et in vivo dans l'ostéoclaste actif et quiescent, nous avons produit plusieurs anticorps. Une extraction protéique et un fractionnement subcellulaire seront effectués à partir d'ostéoclastes en culture et chaque fraction sera analysée par Western Blot. In vivo, Gl sera colocalisée par immunofluorescence dans les ostéoclastes actifs et quiescents en utilisant nos anticorps anti-Gl et des anticorps correspondant à des protéines connues.

Contexte

Section :
Biochimie, biologies cellulaire et moléculaire
news icon Domaine de la communication :
Biochimie, biologies cellulaire et moléculaire
host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

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