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Résumé du colloque
Chez les bactéries, l'initiation de la synthèse protéique débute par la liaison de la sous-unité ribosomique 30S à des sites spécifiques sur les RNA messagers. Cette liaison est contrôlée par l'interaction de Shine-Dalgarno, entre l'extrémité 3' du RNA 16S et une séquence complémentaire précédant la région codante des RNA messagers. Cependant, plusieurs indications dans la littérature suggèrent que des interactions additionnelles favoriseraient l'initiation de la traduction de certains messagers, comme par exemple, des appariements entre le début de la région codante d'un messager et la région à l'extrémité 5' du RNA 16S. Pour vérifier cette suggestion, nous avons construit un plasmide dérivé de Bluescript, pLR-CAT, contenant le gène codant pour la chloramphénicol acétyl transférase (CAT) sous contrôle d'un promoteur T7, et nous avons introduit des mutations au début de la région codante du gène CAT, afin de favoriser des appariements entre les messagers CAT et l'extrémité 5' du RNA 16S. Les messagers CAT mutés ont été produits par transcription in vitro des différents dérivés de pLR-CAT et l'affinité de la 30S pour ces messagers a été évaluée par la technique de "toeprint" (inhibition d'extension d'une amorce). Nos résultats préliminaires révèlent une augmentation de l'affinité de la sous-unité 30S pour les RNA messagers, en accord avec l'hypothèse de départ.
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