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Résumé du colloque
Les causes de l'inactivation immédiate des coliphages T7 traités par les agents alkylants monofonctionnels sont encore mal connues. Nous nous sommes demandé si l'alkylation des protéines de l'enveloppe du phage ne pourrait pas être responsable d'une partie de cette inactivation. Dans le but d'étudier ce problème, nous avons examiné les premières étapes de l'infection (échéance) par des phages T7, traités ou non par EMS ou MMS, dont le DNA était marqué au tritium. Après 8 minutes de contact entre phages et bactéries, la suspension est centrifugée à faible vitesse; le pourcentage de radioactivité présent dans le culot bactérien mesure le taux d'adsorption des phages. Pour mesurer la fraction du DNA phagique injecté aux bactéries, les bactéries du culot sont lysées à l'aide de lysozyme-EDTA; le lysat est traité par la DNase avant d'être centrifugé à grande vitesse. Le pourcentage de radioactivité présent dans le surnageant mesure la fraction du DNA phagique qui a été injecté aux bactéries. Les résultats montrent que l'alkylation par l'EMS ou le MMS n'influence pas l'adsorption des phages aux bactéries. D'autre part, un traitement de 2 h à 37° C par l'EMS ou MMS, qui provoque une inactivation immédiate de 92.5 %, empêche 15 % des phages d'injecter leurs DNA aux bactéries.
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