Communication

Rôle des hélices alpha-3 et alpha-4 dans la formation de pores par la toxine insecticide Cry1Aa de Bacillus thuringiensis

Vincent Vachon

Florence Coux

Cécile Rang

Jean-Louis Schwartz

Roger Frutos

Raynald Laprade

Luke Masson

Roland Brousseau

Gabrielle Préfontaine

Lucie Marceau

Membre a labase

Vincent Vachon

Résumé de la communication

La toxicité des protéines insecticides du bacille de Thuringe (Bacillus thuringiensis) est due à leur capacité à former des pores dans la membrane luminale de l'intestin moyen des insectes sensibles. Les hélices alpha du domaine I de ces toxines sont probablement responsables de l'insertion de la toxine dans la membrane et de la formation des pores. Dans le but de préciser le rôle respectif de ces hélices, chacun des résidus chargés des hélices 3 et 4 de la toxine Cry1Aa, à l'exception de ceux qui participent à des ponts salins intramoléculaires, a été remplacé, par mutagénèse dirigée, par un acide aminé neutre ou de charge inverse. L'activité de ces mutants a été évaluée avec des vésicules isolées de la membrane luminale de l'intestin des larves du sphynx du tabac (Manduca sexta) et une technique de gonflement osmotique fondée sur des mesures de la lumière diffusée par la suspension de vésicules. Tous les mutants de l'hélice 3, sauf ceux dont la mutation se situe en position 99, ont conservé une capacité à former des pores semblable à celle de la Cry1Aa, après une préincubation d'une heure avec les vésicules. La plupart de ces mutations entraîne cependant une diminution de la vitesse avec laquelle les pores sont formés, indépendamment de la position de la mutation. Par contre, tous les mutants de l'hélice 4, sauf ceux dont la mutation se situe en position 127, ont une activité réduite même après une préincubation prolongée avec les vésicules. Ces résultats appuient l'hypothèse selon laquelle l'hélice 4, plutôt que l'hélice 3, se retrouve au niveau de la paroi du pore dans la membrane intestinale. L'hélice 3 semble cependant jouer un rôle très important dans l'insertion de la toxine et la formation du pore.

Contexte

Section :

Biophysique

Domaine de la communication :

Biophysique

Hôte : Université de Montréal

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