Colloque

Rôle des hélices α de l'apolipoprotéine A-I dans son interaction avec les phospholipides

Philippe G. Frank

Yves L. Marcel

Membre a labase

Philippe G. Frank

Résumé du colloque

Les lipoprotéines de haute densité (HDL) jouent un rôle très important dans le transport inverse du cholestérol. Cette voie métabolique permet le transport du cholesterol à partir des cellules périphériques vers le foie où il peut y être dégradé. L’apolipoprotéine A-I (apoA-I) forme la protéine majeure associée aux HDL. Elle permet grâce à ces helices a amphipatiques de lier les phospholipides ainsi que de promouvoir le transfert du cholestérol des cellules vers les HDL. Dans notre étude, nous avons voulu déterminer quelles étaient les domaines importants pour la liaison avec les lipides, fonction qui semble nécessaire au rôle de l’apoA-I. Nous avons donc produit après mutagénèse dirigée trois mutants de délétion qui correspondent chacun à l’élimination de deux helices a amphipatiques (résidus 100-143, 122-165 et 144-186). Ces trois mutants ont été exprimés avec succès dans Escherichia coli. Ils ont été caractérisés pour leur capacité à lier les phospholipides. Ils forment des complexes discoidal de taille reduite en comparaison de ceux obtenus avec l’apoA-I. Ce résultat correspond à l’élimination de deux hélices censées interagir avec les lipides. Les résidus 100-186 forment certainement 4 hélices amphipatiques lorsque la protéine interagit avec les phospholipides. Cependant lorsque des cinétiques d’association avec les phospholipides sont réalisées, les mutants 122-165 et 144-186 réagissent plus lentement que le mutant 100-143 et l’apoA-I. Ces résultats montrent que les hélices 122-186 interagissent fortement et rapidement avec les lipides alors que l’hélice 100-121 a une affinité plus faible pour ces lipides. En conclusion, l’étude de ces mutants semble démontrer l’existence de domaines s’associant préférentiellement avec les lipides. Une helice a (100-121) semble avoir une affinité réduite en comparaison des trois autres helices a. Cette helice pourrait permettre la formation de complexes de taille variable.