Colloque

Sélection de mutants par la méthode au BUdR

R. Labrecque

J.P. Thirion

Membre a labase

R. Labrecque

Résumé du colloque

Parmi les méthodes de sélection de mutants de cellules somatiques, celle utilisant le bromodéoxyuridine (BUdR) est la plus simple (PNAS 1968, 60, 1275). Son application est cependant limitée parce que 1) le BUdR inhibe la ribonucléotide réductase (RRase) et 2) il y a compétition pour la synthèse du DNA entre le BUTP et le thymidine tri-phosphate (TTP) synthétisé. Nous avons montré que cette méthode peut être améliorée si le milieu contient en plus du BUdR de la déoxycytidine (dC) et du 5-fluoro-2 déoxyuridine (FdU). Le dC lève l’inhibition allostérique du BUdR sur la RRase et le FUdR bloque la synthèse endogène de thymidine. Nous avons aussi montré: 1) par centrifugation à l’équilibre en présence de CsCl2 que le pourcentage de BUdR est diminué en plus grande quantité le BUdR si le milieu contient un plus grand nombre de cellules devenues BUdR dépendantes. 2) que les cellules devenues BUdR dépendantes sont plus sensibles à la lumière que si le milieu contient 2·10−4 M dC et 1·5 5·10−5 M FUdR alors que les cellules BUdR indépendantes sont aussi plus sensibles à la lumière que si le milieu ne contient que 5·10−5 M BUdR alors qu’un plus grand pourcentage de BUdR dans le DNA.

Contexte

Section :

Biochimie, biologie cellulaire et moléculaire

Thème du colloque :

Biochimie, biologie cellulaire et moléculaire

Hôte : Université de Moncton

Découvrez d'autres communications scientifiques

Dans le même colloque
Du même congressiste

Titre du colloque :

Biochimie, biologie cellulaire et moléculaire

Utilisation des marqueurs de surface pour l’étude des protéines membranaires des cellules HeLa

M. Fehlmann

Mutants galactokinase− d’hamster chinois résistant au 2-déoxygalactose (gal−)

D. Banville

Effet de quelques hydrolases sur l'enzyme acétylcholinestérase du globule rouge

M.F. Islam

Voir tous les contenus de ce colloque

Autres communications du même congressiste :

Thème du colloque :

Biochimie, biologie cellulaire et moléculaire

Mutants galactose- de cellules d'hamster chinois

R. Labrecque

Sélection de mutants par la méthode au BUdR

R. Labrecque