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Séparation de stéroïdes urinaires conjugués sur gels lipophiliques échangeurs d'ions et analyse par chromatographie en phase gazeuse à haute résolution (GC) et GC/MS/COM

Lison Dubreuil
Robert Masse
Lyne Tremblay
François Messier
LD

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Lison Dubreuil

Résumé du colloque

Nous présentons une méthode simple et générale pour l'analyse des profils métaboliques des stéroïdes urinaires par GC et GC/MS/COM. Dans un premier temps, les stéroïdes sont extraits par un support solide (XAD-2 ou Sep-Pak C18). La première étape de purification de l'extrait urinaire consiste à éliminer les substances basiques par filtration sur un gel lipophilique échangeur de cations (sulfo-propyl-Sephadex LH-20). Les stéroïdes sont par la suite fractionnés selon les trois groupes neutres (non conjugués), monoglucuronide, sulfate et disulfate sur un échangeur d'anion lipophilique de-hydroxybutyl, le tertahydroxypropyl Sephadex LH-20 (TEAP-LH-20). Les stéroïdes conjugués sont libérés par une brève hydrolyse enzymatique ou par solvolyse et purifiés sur TEAP-LH-20. Les stéroïdes sont nettement transformés en dérivés O-méthyloximes et éthers triméthylsilylés, puis analysés par GC et GC/MS/COM. Les avantages de cette méthode seront illustrés et quelques applications pertinentes seront présentées.

Contexte

Section :
Biologie cellulaire
news icon Thème du colloque :
Biologie cellulaire
host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

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Titre du colloque :

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