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Séparation des oligonucléotides sur couche mince de PEI cellulose

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B. Larue

Résumé du colloque

Le travail a porté sur la séparation des oligonucléotides obtenus par hydrolyse du RNA 4S par les RNases A et T1. Sur couche mince de polyéthylèneimine (PEI) cellulose, nous avons pu séparer 100 μg de l'hydrolysat de PHE-t-RNA de levure: la séparation est comparable à ce qu'on obtient sur colonne de DEAE cellulose avec des quantités au moins 10 fois supérieures et aucun matériel n'est laissé à l'origine. L'éluant le plus utile était (NH4)2CO3 0.25M, mais nous avons trouvé que la résolution était augmentée de façon très notable par prétraitement des plaques à l'acide acétique; dans la seconde dimension nous avons utilisé soit un système acide isobutyrique-NH4OH aqueux, soit un système tamponné à pH 7.5 (NH4)2SO4 saturé /2-propanol. Les résultats obtenus avec le 4S et le PHE-t-RNA démontrent que la technique peut être utilisée pour la détermination de la séquence des RNA de transfert.

Contexte

Section :
Biochimie
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Biochimie
host icon Hôte : Université Laval

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Titre du colloque :

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