Colloque

Sonde oligonucleotidique mixte pour la détection du gène de la Beta-lactamase OXA-2

Stéphan Gagnon

Marc Ouellette

Paul H. Roy

Membre a labase

Stéphan Gagnon

Résumé du colloque

Chaque Beta-lactamase plasmidique des bactéries à Gram négatif a un comportement enzymatique différent. Pour l'étude épidémiologique de ces gènes de résistance, nous développons des sondes d'ADN pour leur détection. Différentes sondes fragments ont déjà été construites mais nos résultats indiquent que ces sondes ne sont pas toujours spécifiques. Pour contourner ce problème, une nouvelle stratégie faisant appel à des sondes oligonucleotides a été adoptée. La Beta-lactamase OXA-2 est codée par le plasmide de résistance R167 et la séquence N-terminale de la protéine est connue. Le plasmide recombinant pIJ34 a été obtenu en clonant le gène CXX-2 dans le plasmide vecteur pACYC184. Une sonde oligonucleotide mixte a été construite en se basant sur la traduction inverse des 5 premiers acides aminés de la protéine OXA-2. Suite à un transfert de Southern de digestions de pIJ34, la sonde mixte a permis de localiser avec précision le fragment d'ADN homologue à la sonde mixte, démontrant la validité d'une telle approche. Une sonde oligonucleotide unique OXA-2 est maintenant disponible et sa spécificité est actuellement éprouvée.

Contexte

Section :

Biochimie

Thème du colloque :

Biochimie

Hôte : Université de Montréal

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Titre du colloque :

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