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Sondes d'ADN synthétiques permettant l'identification rapide de la résistance aux antibiotiques

Maurice Boissinot
Roger C. Levesque
Martine Lafond
Josée Mercier
MB

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Maurice Boissinot

Résumé du colloque

Chez les bactéries à gram-négatif, l'électrofocalisation comparative permet de distinguer plus de 26 β-lactamases différentes codées par des plasmides. Comme alternative à cette méthode, nous avons construit des sondes d'ADN synthétiques. Le clonage moléculaire et l'édition de fragments d'ADN nous ont permis de localiser les gènes β-lactamases CARB-4, PSE-4 et SHV-1. Des fragments d'ADN interne aux gènes structuraux ont été séquencés selon la méthode de didéoxy. À partir de nos résultats et des séquences d'ADN connues TEM-1 et OXA-2, nous y avons synthétisé une série de sondes oligonucléotidiques par la chimie des phosphotriesters. La spécificité de chaque sonde a été vérifiée par hybridation avec l'ADN purifié de 20 gènes β-lactamases différents, clonés dans notre laboratoire. La détermination de la séquence de ces 20 gènes permettra de développer d'autres sondes pour un diagnostic rapide de la résistance aux antibiotiques.

Contexte

Section :
Biologie moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biologie moléculaire
host icon Hôte : Université d’Ottawa

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Titre du colloque :

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