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Spectrométrie de masse quantitative des protéines liées au poly(ADP-ribose) par l'approche SILAC

MI

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Maxim Isabelle

Résumé de la communication

Isabelle M, Gagné J.P, Gagné P et Poirier GG. Introduction La poly(ADP-ribosyl)ation (pADPr) est une modification post-traductionnelle covalente effectuée par les poly(ADP-ribose) polymerases (PARPs) sur de nombreuse protéines. Suite à un stress génotoxique, la PARP-1 est activée et catalyse la formation de pADPr en fonction de la sévérité du dommage à l’ADN. Ainsi, pour des dommages mineurs à l’ADN, le faible niveau de pADPr permet le recrutement de protéines de réparation alors qu’un dommage à l’ADN trop important engendrer une accumulation excessive de pADPr conduisant à l’apoptose. Le pADPr libre ou associé à des protéines cibles pourrait aussi être à l’origine d’interactions non-covalentes nécessaires à la formation de complexes protéiques secondaires engendrant une réponse pADPr-dépendante. Cette étude vise à déterminer les complexes associés au pADPr au cours du temps en fonction d’un stress génotoxique croissant. Méthode Des cellules humaines ont été cultivées en présence d’acides aminés (lysine et arginine) marqués selon la méthode « stable isotope labeling with animo acid in cell culture » (SILAC). Cette méthode est basée sur l’incorporation d’acides aminés lourds et de légers dans deux expériences distinctes. Ainsi, il est possible de mesurer un ratio relatif entre ces deux conditions (lourd vs léger) pour chaque peptide identifié. Les cellules, ainsi marquées, furent soumises à un stress génotoxique durant une période croissante. Par la suite, un protocol d’imm

Résumé du colloque

Plusieurs conférenciers de marque participeront à ce colloque, et nous coordonnons avec le réseau national Canadien de protéomique l’attribution d’un prix annuel qui pourrait être décerné lors de cet événement.

Contexte

host icon Hôte : Université de Montréal

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