Stabilisation des messagers 3β-Hydroxystéroïde Déshydrogénase (3β-HSD) et estradiol 17β-Hydroxystéroïde Déshydrogénase (E-17β-HSD) par l'AMPc dans la lignée JEG-3
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Résumé du colloque
Nos études antérieures ont clairement démontré que l'AMPc était impliqué dans la régulation de l'expression des enzymes stéroïdogéniques 3β-HSD et E-17β-HSD dans les cellules JEG-3. De plus, nous avons aussi démontré que l'activation du mécanisme de transduction par l'AMPc lors de l'inactivation de l'enzyme 3β-HSD dépendait des facteurs labiles alors que l'effet de l'AMPc sur les niveaux de messagers de l'estradiol 17β-HSD s'effectuait via des protéines associées. Dans cette étude, nous avons défini le rôle de l'AMPc sur la stabilisation de ces messagers en mesurant la vitesse de disparition des ARNm sur un niveau stimulé par l'AMPc de même qu'en présence d'actinomycine D pour diminuer de ½ synthèse néonculable. Dans un premier temps, nous avons préincubé les cellules en présence de l'analogue 8CPTcAMP (1.5mM) pour 12h, rincé et incubé pour différentes périodes de temps en présence ou en absence d'AMPc. Pour les expériences avec l'actinomycine D, nous avons préincubé les cellules avec 5μM de cet inhibiteur avant la seconde incubation en présence ou en absence d'AMPc. Les messagers 3β-HSD et E-17β-HSD ont été isolés et analysés par Northern blot et quantifiés par dot blot. Ces expériences nous indiquent que l'AMPc en plus de son effet transcriptionnel, stabilise ces messagers par un facteur 2.
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