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Stabilité de production de baculovirus dans un système cellulaire sans sérum de veau fœtal

Jean-Francois Michaud
Serge Belloncik
JM

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Jean-Francois Michaud

Résumé de la communication

Les baculovirus sont des virus d'insectes très importants à travers le monde. Ils sont virulents pour divers insectes ravageurs des cultures et sont donc utilisés comme bioinsecticides. Ils ont aussi une importance due à leur utilisation généralisée comme vecteur d'expression pour la production de protéines recombinantes. La production de baculovirus en milieu industriel ou de recherche doit se faire à coût minime. À cet effet, des lignées cellulaires ont été développées dans notre laboratoire pour obtenir les plus rentables. Le contenu en ADN de ces lignées a été analysé en cytofluorométrie. Des essais de réceptivité par différents virus ont été effectués sur ces lignées, pour trouver les cellules les plus intéressantes à étudier. Des études d'optimisation de production de baculovirus par les lignées sélectionnées sont en cours. Ainsi, nous avons adapté dans notre laboratoire un système cellulaire à un milieu de culture simple sans ajout de sérum de veau fœtal (SVF) offrant une grande rentabilité de production de baculovirus. Plus de 450 passages de cette lignée cellulaire (Sf9 MM-SF) ont été effectués. Ces cellules supportent encore très bien la réplication des virus de polyédroses nucléaires de Galleria mellonella (GmNPV), du baculovirus recombinant AcLuci (gène de la luciférase au lieu du gène de la polyédrine et promoteur fort de la polyédrine) ainsi que des virus de polyédroses cytoplasmiques (CPV). Par contre, avant de débuter une production massive de baculovirus dans notre système cellulaire, il faut démontrer la stabilité de production de virus et de protéines recombinantes en fonction des passages de virus en fermenteurs. Divers tests ont été effectués à cet effet dans notre laboratoire. Les résultats obtenus seront discutés en fonction de leur importance pour la production massive de bioinsecticides et de protéines recombinantes.

Contexte

Section :
Microbiologie, virologie
news icon Domaine de la communication :
Microbiologie, virologie
host icon Hôte : Université de Montréal

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Thème du communication :

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