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Résumé du colloque
Nous présentons l'établissement des conditions expérimentales d'un système de reconstitution membranaire dans le cadre d'études électrophysiologiques de la membrane apicale du tubule distal. Nous avons soumis le système de reconstitution des contraintes d'optimisation des évènements ionofuges de protéoliposomes avec la bicouche plane, de longévité du système reconstitué, et de flexibilité aux changements de milieu des phases aqueuses adjacentes à la membrane plane. En bref, on obtient qu'un prétraitement à la trioleine et l'utilisation de phospholipides moins insaturés (POPC et POPE) améliore la survie de la membrane plane de plusieurs heures. Aussi, le rendement de la fusion est optimisé par la réalisation mécanique de l'étape de pré-fusion, un milieu cas hyperosmolaire par rapport au milieu vésiculaire et, en un, membrane plane relativement mince (modèle STIF). On présente les résultats d'études des courants calciques unitaires et d'études pharmacologiques réalisées sur ces canaux provenant des membranes apicales du tubule distal et reconstitués en bicouche plane de longue survie.
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