Colloque

Structure et expression du gène TEC de souris

Annie Maltais

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Annie Maltais

Résumé du colloque

Le gène TEC (pour Translocated in Extraskeletal Chondrosarcoma) est impliqué dans certaines tumeurs osseuses humaines de type chondrosarcomes suite à une translocation entre les chromosomes 9 et 22. Cette translocation fusionne l'extrémité 5' du gène EWS (pour EWing Sarcoma), situé sur le chromosome 22, à toute la séquence codante du gène TEC situé sur le chromosome 9. La protéine codée par le gène TEC est un récepteur nucléaire orphelin membre de la superfamille des récepteurs stéroïdiens/thyroïdiens et des récepteurs de l'acide rétinoïque. Ces récepteurs sont des facteurs de transcription impliqués dans la prolifération et la différenciation cellulaire. Pour mieux comprendre le rôle de la protéine TEC chez les mammifères, nous avons entrepris de créer des souris hétérozygotes et homozygotes mutantes pour le gène TEC (souris "knock-out"). Le locus TEC de souris a été isolé à partir d'une banque d'ADN génomique clonée dans un vecteur de type chromosome artificiel bactérien (BAC). Les sondes utilisées pour le criblage et les analyses subséquentes ont été amplifiées à partir de l'ARNm TEC de souris par la technique de RT-PCR. Deux clones, d'environ 90 et 145 kilobases (kb), ont été identifiés et analysés par enzymes de restriction et hybridation avec des sondes correspondants aux différents exons du gène TEC. Un fragment de 13.5 kb contenant les trois premiers exons codant du gène a été sous-cloné dans un vecteur plasmidique et une carte de restriction plus précise a été établie. Un vecteur de recombinaison homologue a été construit à partir de ce fragment et la production de lignées de cellules souches embryonnaires (cellules ES) hétérozygotes mutantes pour le gène TEC est en cours. D'autre part, nous avons analysé le patron d'expression du gène TEC dans différents tissus de souris par hybridation Northern. Avec une sonde correspondant à l'extrémité 5' de l'ARNm TEC, deux transcrits majeurs d'environ 4.8 et 5.9 kb sont détectés dans tous les tissus analysés mais principalement dans le cerveau, le coeur, les poumons, le muscle squelettique et les testicules. Nous poursuivons la caractérisation de ces transcrits qui codent potentiellement pour différentes isoformes de la protéine TEC.

Contexte

Section :

Biologie et génétique moléculaires

Thème du colloque :

Biologie et génétique moléculaires

Responsables :

Louis Bernatchez

Hôte : Université Laval

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Titre du colloque :

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