Colloque

Structure et expression du récepteur nucléaire orphelin TEC chez la souris

Annie Maltais

Membre a labase

Annie Maltais

Résumé du colloque

Une translocation entre les chromosomes 9 et 22, produisant la fusion des gènes EWS (EWing Sarcoma) et TEC (Translocated in Extraskeletal Chondrosarcoma) a été mise en évidence dans certaines tumeurs osseuses humaines de type chondrosarcome mixoïde extrasquelettique. La protéine codée par le gène TEC est un récepteur nucléaire orphelin membre de la superfamille des récepteurs stéroïdiens/thyroïdiens et de l’acide rétinoïque. Ces protéines sont des facteurs de transcription impliqués dans la prolifération et la différenciation cellulaire. TEC présente une homologie plus spécifique à la sous-famille NGFI-B/NURR 1. Pour mieux comprendre son rôle chez les mammifères, nous avons entrepris la création de souris hétérozygotes et homozygotes mutantes pour le gène TEC (souris knock-out). Le locus a été isolé à partir d’une banque d’ADN génomique de souris clonée dans un vecteur de type chromosome artificiel bactérien (BAC). Les sondes utilisées pour le criblage des banques et les analyses subséquentes ont été amplifiées à partir de l’ARNm de souris par la technique de RT-PCR. Deux clones, d’environ 90 et 145 kb, ont été identifiés et analysés par enzymes de restriction et hybridation avec des sondes correspondants aux différents exons du gène TEC. Un fragment de 13 kb contenant les trois premiers exons codants a été sous-cloné et une carte de restriction plus précise a été établie. Un vecteur de recombinaison homologue a été construit à partir de ce fragment et la production de lignées de cellules embryonnaires souches (ES) hétérozygotes mutantes pour le gène TEC est actuellement en cours. Nous avons ensuite poursuivi la cartographie du locus et établi le patron d’expression de TEC dans différents tissus de souris. Deux transcrits majeurs, de 4.8 et 5.9 kb, codant pour la protéine complète ont été identifiés, principalement dans le cerveau, le cœur, les poumons, le muscle squelettique et les testicules. Il existe une autre isoforme de la protéine, tronquée à l’extrémité C-terminale (domaine de liaison au ligand), qui sera mise en évidence par analyse northern. La distribution de la protéine, déterminées par western blot, est plus précisément limitée au cerveau et au muscle squelettique.

Contexte

Section :

Biologie et génétique moléculaires

Thème du colloque :

Biologie et génétique moléculaires

Responsables :

Rémy Aubin

Hôte : Université d’Ottawa

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