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Synthèse de l'ADN complémentaire (ADNc) à l'ARN de la souche U (avirulente) du virus de la mosaïque du tabac (TMV) et insertion dans pBR322 et clonage chez E. coli

C. Simard
E. Soldevila
G. Bellemare
CS

Membre a labase

C. Simard

Résumé du colloque

Nous avons synthétisé l'ADN complémentaire simple brin de l'ARN viral polyadénylé in vitro et homopolymérisé par le dATP les hybrides RNA-DNA hétérogènes obtenus. L'insertion directe des hybrides de ces fragments a été faite dans le site Bam HI, du gène de résistance à la tétracycline de pBR322, homopolymérisé par le dTTP. Après transformation d'E. coli HB101 par les plasmides hybrides, différents clones correspondants à des insertions d'environ 1600, 1200, 980, 700 et 500 paires de bases ont été sélectionnés par leur résistance à l'ampicilline et leur sensibilité à la tétracycline. Nous poursuivons actuellement l'hybridation moléculaire des clones marqués au dCTP-32P et de l'ARN génomique viral, ou de l'ARN partiellement digéré afin de situer l'emplacement de l'ADN inséré des clones par rapport à l'ARN parental. De plus, la digestion par les enzymes de restriction des fragments insérés est comparée à la séquence publiée de l'ARN viral de la souche commune U de TMV.

Contexte

Section :
Biologie cellulaire et moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biologie cellulaire et moléculaire
host icon Hôte : Université du Québec à Trois-Rivières

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Titre du colloque :

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