Colloque

Synthèse et clonage des cDNA du gène de la polyèdre du virus de la polyédrose cytoplasmique d'Euoxa scandens

François Fossiez

Serge Belloncik

Maximilien Arella

Membre a labase

François Fossiez

Résumé du colloque

Le virus de la polyédrose cytoplasmique d'Euoxa scandens, isolé du ver-gris blanc du tabac, est caractérisé par les corps d'inclusion intracytoplasmiques formés dans les cellules infectées. Ce membre de la famille des Reoviridae possède un génome composé de dix segments d'ARN bicaténaire. Il est généralement admis que le dixième et plus petit segment code pour la polyèdre. Cette protéine, principale composante des corps d'inclusion, est produite en très grande quantité au cours du cycle de multiplication. Afin d'étudier l'expression du dixième gène, nous avons synthétisé des ADN complémentaires (cDNA) à partir du génome viral complet. Pour cela, l'ARN viral a été dénaturé à l'aide d'hydroxyde de méthyle mercure avant d'être mis en présence de la transcriptase inverse. La taille des cDNA obtenus a été évaluée après clonage. Le dixième segment, marqué au 32P, constitue une sonde permettant d'identifier les clones correspondant au gène de la polyèdre. Après purification des cDNA sélectionnés, il devient possible de déterminer la séquence du gène d'intérêt.

Contexte

Section :

Biologie moléculaire

Thème du colloque :

Biologie moléculaire

Hôte : Université de Montréal

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