Colloque

Synthèse in vitro d'équivalent dermique humain

François Auger

Philippe Blaude

Carole Marquis

Lucie Saint-Amand

Membre a labase

François Auger

Résumé du colloque

La technique de culture de feuillets épidermiques in vitro permet de recouvrir de façon efficace et à long terme les plaies dermiques. Cependant, ce recouvrement ne possède pas toutes les caractéristiques mécaniques de la peau entière car le derme lui fait défaut. Nous avons donc entrepris de créer in vitro des feuillets bi-laminaires avec une fraction dermique et une autre épidermique afin de combler ce manque. Tout d'abord le feuillet dermique est créé en ajoutant des fibroblastes humains dans une solution de collagène (type VII, origine: queue de rat). Les fibroblastes humains sont obtenus par cytaphérèse ou biopsie cutanée. A partir des cultures de ces fibroblastes des suspensions sont préparées aux concentrations de 2,5 x 10^5 cellules/ml dans des milieux Dulbecco Modifié (Eagle DMEM) avec 10X sérum de veau foetal (SVF) et des antibiotiques. La solubilisation du collagène, en concentration variable de 1,2 à 2,0 mg/ml, se fait grâce à de l'acide acétique dilué 1:1,000. Enfin, en addition dans des Pétris de 100 mm de diamètre séquentiellement 0,84 ml de la suspension cellulaire, 4,18 de DMEM avec SVF 10% et 0,4 à 0,5 ml NaOH 1N pour compenser l'acidité induite par les 3,4 ml de solution de collagène. La gélification survient en 15 à 30 secondes. Au cours des jours qui suivent les fibroblastes entraînent la formation d'un réseau de fibres de collagène et conséquemment une contraction des gels. En dernier lieu 1 ml d'une solution de 5 x 10^5 cellules/ml de kératinocytes humains est versé et déposé en surface du gel pour obtenir le feuillet épidermique. Les feuillets bilaminaires sont prêts en 8 à 12 jours d'incubation à 37°C avec 8% de CO2. Des concentrations variables des composants décrits ci-haut auront permis de déterminer les valeurs optimales pour l'obtention de ces feuillets bilaminaires.

Contexte

Section :

Génie biomédical

Thème du colloque :

Génie biomédical

Hôte : Université d’Ottawa

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Titre du colloque :

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