Colloque

Système continu pour l’obtention de cartes peptidiques par électrophorèse capillaire à basse concentration

Éric Bonneil

Karen C. Waldron

ÉB

Membre a labase

Éric Bonneil

Résumé du colloque

Le cartage peptidique est une technique comparative couramment utilisée pour l’analyse des protéines et l’identification de modifications post-translationnelles. Afin de digérer les protéines, nous avons mis au point un micro-réacteur qui contient de la trypsine immobilisée sur un support solide. Les fragments peptidiques sont collectées à la sortie du micro-réacteur et séparés par électrophorèse capillaire (ÉC). Ce micro-réacteur a montré une bonne reproductibilité des cartes peptidiques pour des concentrations de protéines assez élevées (0.08 mM). Cependant, dans les échantillons biologiques, les fragments peptidiques issus de la digestion de protéines sont souvent à des concentrations inférieures aux limites de détection usuelles par spectrophotométrie. Nous avons donc incorporé un préconcentrateur fait de billes d’octadécylsilane directement connecté au capillaire de séparation. Les performances de ce préconcentrateur pour le cartage peptidique seront présentées. Finalement, nous avons intégré ces divers éléments (i.e. micro-réacteur, préconcentrateur, ÉC) afin de réaliser un système en ligne. Diverses configurations ont été testées. Les résultats seront présentés.