Colloque

Technique pour doser de faibles quantités de protéines malgré la présence de contaminants usuels des extraits cellulaires

T. Leroux

M.R.V. Murthy

Membre a labase

T. Leroux

Résumé du colloque

La méthode colorimétrique de Lowry et al. est grandement utilisée pour le dosage des protéines dans des échantillons biologiques. Cependant, il fut observé que la concentration de protéine déterminée par cette méthode est affectée par une variété de substances habituellement présentes dans les extraits cellulaires, telles que le sucrose, les détergents, les sels, les composés sulfuryl, les acides aminés etc. La tentative de séparer ces substances des protéines par une précipitation acide entraîne souvent une perte des protéines, particulièrement lorsque la quantité de protéines dans l'échantillon est très petite. Dans cette communication, nous décrivons un procédé dans lequel l'échantillon protique est déposé sur des bandes de papier filtre. Ces dernières sont alors débarrassées des matériaux acido-solubles par des lavages successifs dans l'acide trichloroacétique, l'éthanol et l'éther. Les protéines adsorbées sur le papier sont alors dosées par une modification de la technique de Lowry. Cette modification réduit le temps nécessaire au dosage ainsi que le nombre d'étapes. Une réponse linéaire est obtenue pour des quantités de 25 à 125 µg de protéines.

Contexte

Section :

Biochimie et biologie cellulaire et moléculaire

Thème du colloque :

Biochimie et biologie cellulaire et moléculaire

Hôte : Université Laval

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Titre du colloque :

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