Colloque

Transfection optimale de cellules de mammifères par l'ADN SV40

J. Yelle

D. Houde

M. Dion

C. Hamelin

Membre a labase

J. Yelle

Résumé du colloque

La transfection de cellules avec de l'ADN est une technique d'une importance capitale pour le clonage de gènes et l'étude de leur expression au niveau moléculaire. Cependant, l'aspect préservation des cellules a toujours été négligé dans ces expériences. En effet, la transfection est une infection permettant de conserver le maximum de cellules viables a donc été mise au point. Les cellules Véro (rien de singe) ont été utilisées comme indicateurs à cause de leur sensibilité relative au CaCl2. Nos résultats montrent que l'exposition du feuillet cellulaire à une solution de glycérol avant l'addition d'ADN SV40 précipité par le CaCl2 diminue de façon importante les pertes de cellules dues à ce seul permet d'activer une bonne pénétration de l'ADN. L'effet protecteur disparaît toutefois lorsque le traitement au glycérol est fait suite à la transfection. Dans nos conditions, les cultures cellulaires transfectées montrent un bon élément des signes de réplication virale mais le virus a été retrouvé dans le surnageant infecté. Par conséquent, cette technique de transfection présente un net avantage sur les méthodes déjà existantes, en particulier lorsque le nombre de cellules est faible. Nous l'utilisons présentement dans des expériences de transformation cellulaire avec différents types d'ADN.

Contexte

Section :

Biologie cellulaire

Thème du colloque :

Biologie cellulaire

Hôte : Université du Québec à Montréal

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Titre du colloque :

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