Colloque

Tyrosinémie héréditaire: Clonage du gène de la FAH de souris et transfection dans des cellules CV-1

Stéphan Toupin

Robert M. Tanguay

Membre a labase

Stéphan Toupin

Résumé du colloque

La tyrosinémie héréditaire de type I, une maladie autosomique récessive, est caractérisée par une déficience du dernier enzyme du sentier de dégradation de la tyrosine, le fumarylacétoacétate hydrolase (FAH). Dans le but de produire un modèle animal, nous avons entrepris le clonage du gène de la FAH chez la souris. Un ADNc de la FAH de souris a été obtenu en criblant une librairie de foie de souris avec une sonde de FAH de rat (Labelle et al, 1991 Gene, vol.104, p.197-202). Cet ADNc de 1,7kb fut obtenu et introduit dans les 2 orientations (5'-3' et 3'-5') sous le contrôle d'un promoteur MT dans le vecteur d'expression pMEPH pour transfection dans les cellules CV-1. La FAH est exprimée dans les cellules CV-1 transfectées après l'induction par 5µM CdCl. La protéine des cellules transfectées se retrouve en grande partie au noyau, tel qu'indiqué par immunofluorescence avec un anticorps polyclonal dirigé contre la FAH de rat. Parallèlement, des essais immuno-histochimiques sur des coupes de foie, de souris avec un anti FAH de rat purifié par affinité, ont montré que la FAH se retrouve à aussi en grande partie au niveau du noyau des hépatocytes.

Contexte

Section :

Biochimie, biologie moléculaire

Thème du colloque :

Biochimie, biologie moléculaire

Hôte : Université du Québec à Rimouski

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Titre du colloque :

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