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Résumé du colloque
Les dinoflagellés (division Pyrrhophyta) possèdent plusieurs caractéristiques atypiques par rapport aux eucaryotes et ce, surtout au niveau nucléaire. Malgré tout, ils ne sont plus considérés comme des intermédiaires entre les procaryotes et les eucaryotes. Par exemple, l'algue unicellulaire Gonyaulax polyedra possède une phase S et une phase M distinctes, ce qui suggère que la régulation du cycle cellulaire se ferait selon un mécanisme apparenté à celui des eucaryotes. L'entrée en mitose impliquerait alors une protéine kinase de type p34cdc2 et une cycline. Les kinases p34cdc2 possèdent toutes un motif hautement conservé, la séquence PSTAIRE, spécifique aux kinases de ce type. Deux stratégies ont été élaborées afin de retrouver un ADN homologue à cdc2 chez Gonyaulax. Dans la première, un anticorps commercial, dirigé contre un épitope de 16 acides aminés incluant PSTAIRE, a d'abord été utilisé pour déterminer une réaction avec des extraits protéiques totaux de Gonyaulax, et ensuite pour tenter d'isoler un clone d'ADNc par criblage d'une banque d'expression. Dans la deuxième stratégie, des fragments d'ADN ont été amplifiés par PCR à partir de la banque, en utilisant comme amorces des oligonucléotides dégénérés synthétisés à partir de séquences conservées de différentes kinases cdc2. Les résultats obtenus par les deux approches seront discutés, en tenant compte des différents caractères aberrants des dinoflagellés.
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