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Une nouvelle méthode d'analyse optique permettant de quantifier la densité et l'oligomérisation des protéines in situ

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Antoine Godin

Résumé de la communication

Les interactions protéíne-protéíne à l’intérieure des cellules jouent un rôle clé dans la signalisation cellulaire. Ainsi, il importe de pourvoir mesurer ces interactions dans les différents compartiments cellulaires. Or, réussir à la faire de manière quantitative à l’intérieur des tissus (in situ) demeure un défi de taille. Nous avons développé une nouvelle technique optique qui permet de quantifier la densité et l’oligomérisation de particules fluorescentes à partir d’images individuelles acquises par microscopie confocale. La méthode consiste à ajuster des distributions super-poissonniennes à des histogrammes d’intensités générés à partir d’images. On obtient ainsi une cartographie des densités des particules fluorescentes et leur brillance quantique. Cette technique constitue une extension au domaine spatial de la méthode d’histogrammes de comptage de photons dans le temps développée par le groupe de Gratton. La technique est ainsi autant applicable à l’analyse de tissus fixés qu’à celle de tissus vivants. Elle n’est pas vulnérables aux biais causés par l’hétérogénéité des tissus. L’analyse d’images générées par ordinateur et de marquages immunohistochimiques montre que l’approche fournit des estimés précis et fiables sur une large gamme de densités et sur des petites surfaces (6 µm2). Les avantages et la grande polyvalence de cette technique ouvrent la porte à une nouvelle génération d’études quantitatives sur les interactions protéiques au sein du tissu intact.

Résumé du colloque

La qualité de la recherche effectuée par les professeurs invités dans le cadre de ce colloque est de haut niveau et permettra de favoriser les échanges entre les différents groupes de recherche en biophotonique au Québec.

Contexte

manager icon Responsables :
François Légaré
host icon Hôte : Institut national de la recherche scientifique

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